Crearea unui profil ADN
În cazul în care cu toții ar trebui să ajungă la un rezultat similar - un profil unic ADN - Atunci de ce există atât de multe tehnici diferite de analiză? Care tehnica de a utiliza depinde de o serie de factori, inclusiv costul, timpul disponibil pentru analiză și calitatea și cantitatea de probă ADN.
Prima metodă de a crea un profil ADN a fost RFLP, sau lungimii fragmentului de restricție polimorfism. RFLP nu este folosit la fel de des astăzi, pentru că este nevoie de un esantion mare de ADN-ului - la fel de mult ca 25 de fire de păr sau un loc-nichel dimensiuni de fluid corporal - si poate dura atâta timp cât o lună pentru a finaliza [sursa: Baden]. Acesta necesită, de asemenea examinarea mai multe secțiuni ale componenta ADN-ului pentru a găsi variante, care este consumatoare de timp și lasă mai mult loc pentru erori umane. Unele dintre măsurile pentru analiza RFLP sunt, de asemenea, utilizate în alte tipuri de profilare ADN. Pentru RFLP, pașii sunt:
- globule albe și roșii separate cu o centrifugă.
- nuclee de ADN extras din celulele albe din sange. Acest lucru se face prin baie celulele în apă fierbinte, apoi adăugarea de sare, și punerea amestecul înapoi în centrifugă [Sursa: Universitatea din Arizona].
- Cut ADN Strand in fragmente, folosind o enzimă de restricție.
- fragmente Loc într-un capăt al-un pat de gel de agaroză cu electrozi în ea. Gel de agaroză este fabricat din agar-agar, un tip de alge marine care se transformă în gelatină când se dizolvă în apă clocotită.
- Utilizați un curent electric pentru a sorta segmentele de ADN de lungime. Acest proces se numește electroforeză pe gel de agaroză. Electroforeza se referă la procesul de mutare a moleculelor fiind încărcați negativ prin gel cu energie electrică. Segmente mai scurte muta mai departe de locația lor originală, în timp ce cele mai lungi sta mai aproape. Segmentele alinia în șiruri paralele.
- Utilizați o foaie de nitroceluloză sau nailon pentru a șterge ADN-ul. Folia este pătată atât lungimile diferite ale benzilor de ADN sunt vizibile cu ochiul liber. Prin tratarea foaia cu radiatii, este creat un autoradiografie. Aceasta este o imagine pe film de raze X lasat de modelul dezintegrare a radiației. Autoradiografiei, cu benzi sale de culoare închisă distincte paralele, este profilul ADN. Site-ul
PCR (reacția în lanț a polimerazei)
